采用木瓜蛋白酶對羅非魚肌肉蛋白組分(肌漿蛋白、肌原纖維蛋白、基質(zhì)蛋白)進(jìn)行酶解,研究羅非魚不同蛋白組分酶解產(chǎn)物的抗氧化活性,并通過超濾、凝膠過濾色譜、反相高效液相色譜對高活性肌漿蛋白組分抗氧化肽進(jìn)行分離純化,同時(shí)對純化后的抗氧化肽氨基酸組成予以分析。結(jié)果表明:羅非魚肌漿蛋白酶解物(tilapia sarcoplasmic protein hydrolysates,TSPH)抗氧化活性高于肌質(zhì)與肌原纖維蛋白酶解物,當(dāng)肌漿蛋白酶解4 h時(shí),TSPH(6 mg/mL)對1,1-二苯基-2-三硝基苯肼(1,1-diphenyl-2-picrylhydrazyl,DPPH)自由基、羥自由基清除率及其還原力均達(dá)到最高,分別為84.61%、50.01%和0.629;經(jīng)超濾分離后,其分子質(zhì)量小于5 kDa的組分具有較高的抗氧化活性;該組分經(jīng)凝膠色譜分離后,富集得到E1~E4共4 個(gè)組分,其中E3組分(0.8~0.3 kDa)的抗氧化活性最高, 3 mg/mL E3組分對DPPH自由基清除率達(dá)83.61%,還原力為0.953;E3組分再經(jīng)反相高效液相色譜分離純化后,富集得到F1~F9共9 個(gè)組分,其中F4組分的抗氧化活性最高,其DPPH自由基的半清除質(zhì)量濃度為0.78 mg/mL,且經(jīng)氨基酸組成分析發(fā)現(xiàn)色氨酸(Trp)、甘氨酸(Gly)、組氨酸(His)為其含量較高的氨基酸,相對含量分別高達(dá)31.20%、27.25%和8.97%。
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