通過體外模擬消化,研究不同消化時(shí)間下谷蛋白結(jié)構(gòu)與抗氧化和血管緊張素轉(zhuǎn)換酶(angiotensin-converting enzyme,ACE)抑制活性的關(guān)系。利用內(nèi)源熒光光譜和傅里葉變換紅光譜測(cè)定谷蛋白水解過程結(jié)構(gòu)變化。通過測(cè)定水解產(chǎn)物抗氧化能力和ACE抑制率表征酶解產(chǎn)物的活性,利用四極桿串聯(lián)飛行時(shí)間質(zhì)譜鑒定具有抗氧化和ACE抑制活性的組分。結(jié)果表明,谷蛋白水解度在2 h內(nèi)快速增加,隨后趨于平緩。水解導(dǎo)致谷蛋白λmax紅移且熒光強(qiáng)度增強(qiáng),α-螺旋含量顯著增加、β-折疊相對(duì)含量顯著降低(P<0.05)。α-螺旋結(jié)構(gòu)含量的增加降低了水解物的抗氧化能力,谷蛋白β-折疊結(jié)構(gòu)含量的減少能增強(qiáng)水解物的ACE抑制能力。水解0.5 h抗氧化能力最強(qiáng),1,1-二苯基-2-三硝基苯肼自由基清除率的半抑制濃度(half maximal inhibitory concentration,IC50)為(1.113±0.015)mg/mL,·OH清除率IC50為(0.518±0.053)mg/mL、Fe2+螯合能力IC50為(0.678±0.019)mg/mL。ACE抑制率先增加后降低,在2 h達(dá)到最高,IC50為(0.693±0.011)mg/mL。水解度的增加降低了水解物抗氧化能力,但增強(qiáng)了ACE抑制能力。水解物在0.5~2 h抗氧化能力和ACE抑制能力呈現(xiàn)負(fù)相關(guān)關(guān)系,隨后抗氧化能力和ACE抑制能力均下降。水解物抗氧化肽和ACE抑制肽分子質(zhì)量均小于2 kDa,篩選出以VEGGFLFIV為代表抗氧化活性多肽,且ACE抑制肽大部分N-端是疏水性氨基酸或者堿性氨基酸。因此,通過控制谷蛋白體外消化水解度,可制備最優(yōu)的大米谷蛋白抗氧化或降血壓相關(guān)功能性產(chǎn)品。
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