目的:以金黃色葡萄球菌為宿主菌,分離裂解性噬菌體vB_SauM_RS,測定其生物學(xué)特性,并探究其在兩種牛奶中的抑菌效果及對(duì)生物被膜的清除作用。方法:將噬菌體與金黃色葡萄球菌以1∶100的比例(菌體數(shù)量比)分別接種于脫脂牛奶和全脂牛奶中,分別在4 ℃和25 ℃環(huán)境下處理,測定不同時(shí)間脫脂牛奶和全脂牛奶中細(xì)菌濃度和噬菌體效價(jià),分析噬菌體在兩種牛奶中的抑菌效果;之后通過結(jié)晶紫染色、平板計(jì)數(shù)法和雙層平板法測定經(jīng)噬菌體處理后不同時(shí)間膜內(nèi)細(xì)菌濃度和噬菌體效價(jià),分析vB_SauM_RS對(duì)不同材料表面生物被膜的清除效果,并通過熒光顯微鏡觀察生物被膜清除前后膜內(nèi)細(xì)菌數(shù)量的變化。結(jié)果:vB_SauM_RS形成的噬菌斑清晰透亮、外有暈環(huán);透射電子顯微鏡觀察其屬于肌尾噬菌體科;最佳感染復(fù)數(shù)為0.01、潛伏期為20 min、平均裂解量為39 PFU/cell,其在20~50 ℃和pH 4.0~11.0條件下穩(wěn)定,具有高效的裂解效率;vB_SauM_RS在牛奶中抑菌作用明顯,與對(duì)照組相比,在低溫(4 ℃)條件下24 h使脫脂牛奶和全脂牛奶中細(xì)菌濃度分別下降1.079(lg(CFU/mL))和1.021(lg(CFU/mL)),在室溫(25 ℃)條件下24 h使脫脂牛奶和全脂牛奶中細(xì)菌濃度分別下降5.418(lg(CFU/mL))和5.740(lg(CFU/mL));通過平板計(jì)數(shù)法和熒光顯微鏡觀察顯示vB_SauM_RS對(duì)生物被膜內(nèi)細(xì)菌的清除效果明顯,對(duì)不同材料表面生物被膜均有良好的清除效果。結(jié)論:vB_SauM_RS不僅對(duì)牛奶中金黃色葡萄球菌有良好的裂解效果,對(duì)生物被膜也有很好的清除效果,具有作為金黃色葡萄球菌生物抗菌劑的應(yīng)用潛力。
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