以聚乙二醇為分散劑和穩(wěn)定劑,用氧化低價(jià)鐵鹽的方法制成具有磁響應(yīng)性的微球,用1.33%濃度的該磁性微球吸附分離菠蘿皮汁中的蛋白酶,回收率達(dá)61.96%,酶活性3.8×10 ̄4u/g。固定化后成為具有磁響應(yīng)性的磁性菠蘿蛋白酶,回收方便。固定化的最佳條件為:戊二醛濃度0.19%,PH4.3,溫度25°C。最適反應(yīng)溫度60°C,最適pH值8.8~9.7,往堿性偏移,酪蛋白底物的k_m值為1.1×10_-5mol/L,比游離酶的8.I×10_-5mol/L大。固定化磁性菠蘿蛋白酶的熱穩(wěn)定性有顯著的提高,常溫下的半衰期為28天左右。等電聚焦電泳圖譜表明,菠蘿皮計(jì)中有6種同工酶組份,均可被磁性微球團(tuán)載,固定化后6種酶組份的等電點(diǎn)保持不變。
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