以食源性致病菌大腸桿菌為指示菌,研究抗菌肽brevilaterin與檸檬酸的協(xié)同抑菌效應(yīng)和機(jī)理,為抗菌肽和檸檬酸應(yīng)用于大腸桿菌的控制提供理論依據(jù)。利用DiSC3(5)熒光探針考察brevilaterin與檸檬酸對(duì)大腸桿菌細(xì)胞膜電勢(shì)的影響,結(jié)果表明兩者單獨(dú)使用均能消散大腸桿菌的跨膜電勢(shì),兩者聯(lián)用呈現(xiàn)協(xié)同消散效果;通過(guò)碘化丙啶/SYTO 9探針標(biāo)記結(jié)合流式細(xì)胞術(shù)考察brevilaterin與檸檬酸對(duì)細(xì)胞膜完整性的影響,結(jié)果表明brevilaterin與檸檬酸均會(huì)破壞細(xì)胞膜完整性;利用透射電子顯微鏡觀察大腸桿菌超微結(jié)構(gòu)的變化,結(jié)果發(fā)現(xiàn)brevilaterin和檸檬酸聯(lián)用組對(duì)菌體超微結(jié)構(gòu)呈現(xiàn)協(xié)同破壞作用,即細(xì)胞產(chǎn)生變形、發(fā)生質(zhì)壁分離與內(nèi)容物泄漏等;十二烷基硫酸鈉-聚丙烯酰胺凝膠電泳結(jié)果顯示brevilaterin、檸檬酸對(duì)大腸桿菌的蛋白質(zhì)合成沒(méi)有明顯影響;瓊脂糖凝膠電泳表明brevilaterin與檸檬酸可以降解大腸桿菌菌體DNA,兩者聯(lián)用呈現(xiàn)協(xié)同降解作用。綜上,brevilaterin與檸檬酸可通過(guò)破環(huán)細(xì)胞膜的完整性與降解菌體DNA以發(fā)揮協(xié)同抑制大腸桿菌的作用。
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