通過熒光光譜法、2,2’-聯(lián)氮-雙-3-乙基苯并噻唑啉-6-磺酸陽離子自由基清除能力測(cè)定法、1,1-二苯基-2-三硝基苯肼自由基清除能力測(cè)定法、鐵離子還原/抗氧化能力法和間接ELISA法探究親水性的葉酸(folic acid,F(xiàn)A)、疏水性的視黃醇(VA)與β-乳球蛋白(β-lactoglobulin,β-LG)三元復(fù)合物的形成機(jī)制及復(fù)合物的抗氧化性和致敏性變化。結(jié)果表明:FA和VA對(duì)β-LG具有較強(qiáng)的熒光猝滅,猝滅方式主要為靜態(tài)猝滅。結(jié)合常數(shù)和結(jié)合位點(diǎn)數(shù)及熱力學(xué)參數(shù)表明它們之間主要通過疏水相互作用形成結(jié)合常數(shù)(Ka)大于104 L/mol、物質(zhì)的量比為1的較穩(wěn)定的三元復(fù)合物。通過比較FA和VA不同添加順序?qū)Ζ?LG熒光猝滅的程度可知,VA的存在會(huì)影響FA對(duì)β-LG的親和性,而FA的存在不會(huì)影響VA對(duì)β-LG的親和性。FA和VA單獨(dú)與β-LG形成二元復(fù)合物時(shí),與對(duì)照組相比抗氧化性沒有顯著性差異,當(dāng)VA和FA共同與β-LG形成三元復(fù)合物時(shí),抗氧化能力會(huì)高于二元復(fù)合物,但不同的結(jié)合順序?qū)?fù)合物的抗氧化性沒有顯著影響。此外,β-LG-FA-VA致敏性抑制率降低為42.23%,β-LG-VA-FA致敏性抑制率增加為70.32%,由此可知不同的結(jié)合順序會(huì)對(duì)β-LG的致敏性產(chǎn)生不同程度的影響。
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