目的:探究鼠尾草酸對游離脂肪酸(free fatty acids,F(xiàn)FAs)誘導(dǎo)的HepG2細(xì)胞脂肪積累的作用機(jī)制。方法:采用FFAs(油酸-棕櫚酸濃度比2∶1)誘導(dǎo)建立HepG2細(xì)胞高脂模型,使用不同濃度的鼠尾草酸(15、20 μmol/L)、FFAs(1 mmol/L)、AMP依賴的蛋白激酶(adenosine 5’-monophosphate activated protein kinase,AMPK)抑制劑(2 μmol/L)處理細(xì)胞24 h后,通過測定細(xì)胞內(nèi)脂肪含量、細(xì)胞活力、總膽固醇(total cholesterol,TC)和甘油三酯(triglyceride,TG)含量,脂肪代謝相關(guān)基因的轉(zhuǎn)錄表達(dá)水平以及磷酸化腺苷酸活化蛋白激酶的表達(dá)水平,研究鼠尾草酸的降脂作用機(jī)制。結(jié)果:15、20 μmol/L的鼠尾草酸,1 mmol/L的FFAs單獨(dú)或共同處理細(xì)胞24 h對細(xì)胞的活力沒有顯著性影響;與正常組相比FFAs處理細(xì)胞24 h,油紅O染色結(jié)果顯示,F(xiàn)FAs能顯著增加細(xì)胞內(nèi)的脂肪含量;FFAs能增加細(xì)胞內(nèi)TC、TG含量,增加脂肪合成相關(guān)基因的表達(dá)水平,降低脂肪分解相關(guān)基因的表達(dá)水平(P<0.05)。油紅O染色結(jié)果顯示,與FFAs處理組相比,鼠尾草酸可以降低細(xì)胞內(nèi)的脂肪含量;鼠尾草酸能顯著降低TC、TG含量,顯著下調(diào)脂肪合成相關(guān)基因的表達(dá),且使脂肪氧化相關(guān)基因的表達(dá)水平呈上升趨勢,并顯著上調(diào)磷酸化AMPK的表達(dá)量(P<0.05)。使用AMPK抑制劑共同處理細(xì)胞24 h,對細(xì)胞的活力沒有影響,但可明顯逆轉(zhuǎn)鼠尾草酸的降脂作用(P<0.05)。結(jié)論:鼠尾草酸能通過調(diào)控脂肪相關(guān)基因的轉(zhuǎn)錄水平和AMPK磷酸化激酶的表達(dá)來改善FFAs誘導(dǎo)的HepG2細(xì)胞的脂肪積累。
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