建立液相色譜-串聯(lián)質(zhì)譜技術(shù)測定牛排產(chǎn)品中大豆蛋白含量的方法。首先利用高分辨質(zhì)譜結(jié)合Unitprot數(shù)據(jù)庫,對大豆特異性多肽進行鑒別及篩選,獲得可用于大豆準確定性的多肽序列信息,并利用skyline軟件將多肽序列轉(zhuǎn)換為離子對信息;其次利用液相色譜-串聯(lián)質(zhì)譜(liquid chromatography-tandem mass spectrometry,LC-MS/MS)對大豆蛋白特異性多肽進行確證,構(gòu)建大豆蛋白LC-MS/MS定性判別方法;進一步開展用于定量多肽的篩選研究,最終篩選到線性和回收率較好的定量多肽共3 條,分別為GSDLVNVR、VSDDEFNNYK、LVFCPQQAEDDK,線性相關(guān)系數(shù)均達到0.99以上,加標回收率為81.7%~115.8%,精密度小于13%,檢出限為0.15%,定量限為0.5%;同時對市售28 個牛排進行大豆蛋白含量的測定,構(gòu)建LC-MS/MS方法測定牛排中大豆蛋白含量的方法。結(jié)果表明,該方法特異性好,準確度高,同時可推廣應用至其他肉制品。
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