目的:研究葡萄籽原花青素(grape seed proanthocyanidin extract,GSPE)對順鉑(cisdichlorodiamineplatinum (II),cDDP)誘導(dǎo)小鼠睪丸支持細(xì)胞(TM4)細(xì)胞凋亡、細(xì)胞凋亡形態(tài)及凋亡相關(guān)基因蛋白表達(dá)的影響。方法:體外培養(yǎng)正常TM4細(xì)胞,將實(shí)驗(yàn)細(xì)胞分為空白對照組、cDDP組(0.014 mg/mL)、GSPE(0.005 mg/mL)+cDDP組(0.014 mg/mL)、GSPE組(0.005 mg/mL)。流式細(xì)胞檢測法測定GSPE對cDDP誘導(dǎo)TM4細(xì)胞凋亡率的影響,Hoechst染液染色法測定TM4細(xì)胞凋亡的形態(tài)學(xué)變化,Western blot蛋白免疫印跡法測定凋亡相關(guān)基因蛋白表達(dá)情況。結(jié)果:cDDP可顯著增加TM4細(xì)胞凋亡,顯著降低TM4細(xì)胞Bcl-2表達(dá)量以及處于酶原狀態(tài)Pro-caspase3表達(dá)量,而明顯增加TM4細(xì)胞Bax表達(dá)量,同時(shí)增加處于激活狀態(tài)的Caspase-3表達(dá)量。GSPE可明顯降低cDDP誘導(dǎo)的TM4細(xì)胞凋亡,降低Bax以及Caspase-3表達(dá)量,增加Bcl-2和Pro-caspase3表達(dá)量。結(jié)論:細(xì)胞凋亡在cDDP誘導(dǎo)TM4細(xì)胞毒性過程中起重要作用。Bcl-2、Bax、Caspase-3等蛋白參與cDDP誘導(dǎo)TM4細(xì)胞凋亡,GSPE通過抑制Bax及Caspase-3的蛋白表達(dá)及增強(qiáng)Bcl-2和Pro-caspase3的表達(dá)來阻抑cDDP誘導(dǎo)TM4細(xì)胞的凋亡,從而減輕cDDP誘導(dǎo)TM4細(xì)胞損傷。
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