目的:建立姬松茸多肽提取方法,并研究姬松茸多肽提取物對(duì)D-半乳糖(D-galactose,D-gal)致衰老模型小鼠的保護(hù)作用。方法:硫酸銨沉淀法從姬松茸蛋白酶解物分離多肽,用Sephadex G-50凝膠層析純化得到姬松茸多肽;將ICR小鼠隨機(jī)分為4 組,即空白組、模型組、陽性藥物(吡拉西坦)組和姬松茸多肽組,除空白組外,其余各組小鼠皮下注射300 mg/(kg mb·d)D-gal,建立衰老模型,通過Morris水迷宮和避暗儀測(cè)試小鼠學(xué)習(xí)記憶能力,檢測(cè)小鼠血清總抗氧化能力(total antioxidant capacity,T-AOC)、丙二醛(malondialdehyde,MDA)濃度、過氧化氫酶(catalase,CAT)活力和活性氧(reactive oxygen species,ROS)水平;蘇木精-伊紅(hematoxylin-eosin,HE)染色觀察小鼠腦組織海馬區(qū)神經(jīng)元結(jié)構(gòu)變化;逆轉(zhuǎn)錄聚合酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng)(reverse transcription polymerase chain reaction,RT-PCR)檢測(cè)腦組織中核因子E2相關(guān)因子2(nuclear factor erythroid 2-related factor 2,Nrf2)、NAD(P)H∶醌氧化還原酶(NAD(P)H:quinone oxidoreductase 1,NQO1)、谷氨酸半胱氨酸連接酶(glutamate-cysteine ligase,GCLM)mRNA相對(duì)表達(dá)量。結(jié)果:Sephadex G-50分離得一個(gè)明顯色譜峰即為姬松茸多肽提取物;與模型組比較,姬松茸多肽組小鼠水迷宮及避暗潛伏期縮短,錯(cuò)誤次數(shù)顯著減少(P<0.05或P<0.01),血清CAT活力、T-AOC明顯提高,ROS水平、MDA濃度顯著下降(P<0.05或P<0.01);HE染色結(jié)果顯示,與模型組相比,姬松茸多肽組小鼠神經(jīng)元排列緊密,核固縮細(xì)胞數(shù)量減少;RT-PCR結(jié)果顯示姬松茸多肽組小鼠腦組織中Nrf2、NQO1、GCLM mRNA相對(duì)表達(dá)量顯著增高(P<0.05)。結(jié)論:姬松茸多肽提取物可以對(duì)D-gal致衰老模型小鼠產(chǎn)生保護(hù)作用,可能與其抗氧化作用相關(guān)。
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