領(lǐng)學(xué)術(shù)科研之先，創(chuàng)食品科技之新
—— 中國食品雜志社
金黃色葡萄球菌是食品中常見的致病菌，控制食品中金黃色葡萄球菌的生長繁殖對提高食品安全性至關(guān)重要。本研究以金黃色葡萄球菌作為指示菌，考察了抗菌肽brevilaterin與ε-聚賴氨酸的協(xié)同抑菌機(jī)理。抑菌動力學(xué)結(jié)果表明抗菌肽與ε-聚賴氨酸對金黃色葡萄球菌具有協(xié)同抑菌效果；細(xì)胞膜質(zhì)子動力勢研究結(jié)果顯示，抗菌肽對跨膜pH值梯度無明顯影響，ε-聚賴氨酸會破壞跨膜pH值梯度，1/4最小抑菌濃度（minimal inhibitory concentration，MIC）抗菌肽＋1/4 MIC ε-聚賴氨酸（聯(lián)用組）對跨膜pH值梯度產(chǎn)生了協(xié)同破壞作用；采用流式細(xì)胞術(shù)結(jié)合熒光顯微鏡考察細(xì)胞膜的完整性，發(fā)現(xiàn)抗菌肽對細(xì)胞膜完整性具有較強(qiáng)的破壞作用，1/4 MIC抗菌肽即可導(dǎo)致36.3%的膜破損，而ε-聚賴氨酸對膜完整性損傷較小，1/4 MIC ε-聚賴氨酸僅破壞10.4%的細(xì)胞膜完整性，兩者聯(lián)用可對細(xì)胞膜完整性產(chǎn)生協(xié)同破壞作用，導(dǎo)致51.3%細(xì)胞膜完整性發(fā)生損傷；采用透射電子顯微鏡觀察了細(xì)胞超微結(jié)構(gòu)，發(fā)現(xiàn)抗菌肽和ε-聚賴氨酸聯(lián)用較單獨(dú)使用對細(xì)胞形態(tài)和細(xì)胞內(nèi)容物的泄漏產(chǎn)生了協(xié)同破壞作用；十二烷基硫酸鈉-聚丙烯酰胺凝膠電泳結(jié)果顯示，ε-聚賴氨酸會抑制菌體蛋白質(zhì)的合成或降解蛋白質(zhì)，而抗菌肽對蛋白質(zhì)合成無影響；瓊脂糖凝膠阻滯電泳表明，抗菌肽對菌體DNA條帶無明顯變化，而ε-聚賴氨酸以及兩者聯(lián)用會造成DNA滯留，表明ε-聚賴氨酸可以通過與DNA結(jié)合發(fā)揮抑菌作用。上述結(jié)果表明，抗菌肽brevilaterin和ε-聚賴氨酸聯(lián)用可以增強(qiáng)對細(xì)胞膜的破壞強(qiáng)度，且兼具抗菌肽對呼吸鏈脫氫酶活性的抑制與ε-聚賴氨酸對跨膜pH值梯度的破壞和DNA的結(jié)合作用，從而實(shí)現(xiàn)多靶位協(xié)同抑菌。
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