目的:以1,1-二苯基-2-三硝基苯肼(1,1-diphenyl-2-picrylhydrazyl,DPPH)自由基清除率為指標(biāo),篩選抗氧化能力強(qiáng)的乳桿菌,并研究其對(duì)模擬胃腸道環(huán)境的耐受性及對(duì)丙烯酰胺所致腸上皮細(xì)胞氧化損傷的保護(hù)作用。方法:以DPPH自由基清除率為指標(biāo),篩選得到清除率高的2 株乳桿菌GBE17和GBE29,并進(jìn)行16S rDNA測(cè)序鑒定。構(gòu)建丙烯酰胺誘導(dǎo)的Caco-2氧化損傷模型,通過(guò)形態(tài)學(xué)觀察和測(cè)定細(xì)胞培養(yǎng)上清液、細(xì)胞裂解液中的抗氧化物相關(guān)物質(zhì)及酶活,評(píng)價(jià)其不同處理方式對(duì)Caco-2細(xì)胞氧化損傷的保護(hù)作用,并分別測(cè)定其在pH 3.0、2.5及膽鹽質(zhì)量分?jǐn)?shù)為0.05%、0.1%環(huán)境下處理1~4 h的活菌數(shù)變化。結(jié)果:植物乳桿菌GBE17和唾液乳桿菌GBE29發(fā)酵上清液的DPPH自由基清除率分別為89.44%、79.24%。GBE17的治療組與干預(yù)組和GBE29的干預(yù)組均可降低乳酸脫氫酶的釋放,提高細(xì)胞內(nèi)外超氧化物歧化酶、過(guò)氧化氫酶活性。2 株乳桿菌在pH 3.0和膽鹽質(zhì)量分?jǐn)?shù)0.1%的環(huán)境下處理4 h,存活數(shù)均高于107 CFU/mL。結(jié)論:植物乳桿菌GBE17和唾液乳桿菌GBE29通過(guò)提高細(xì)胞內(nèi)抗氧化酶系的活性,有效地降低丙烯酰胺誘導(dǎo)腸上皮細(xì)胞的氧化損傷,且具有較好的脅迫耐受能力。
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