領(lǐng)學(xué)術(shù)科研之先，創(chuàng)食品科技之新
—— 中國(guó)食品雜志社
建立酸乳中葡糖醋桿菌的賴解旋酶恒溫基因擴(kuò)增(helicase-dependent isothermal DNA amplification,HDA)檢測(cè)方法。根據(jù)葡糖醋桿菌16S基因序列(基因號(hào)為HQ677466.1)設(shè)計(jì)特異性引物,并優(yōu)化反應(yīng)體系中UvrD解旋酶和T4 gp32的濃度。通過(guò)HDA法直接檢測(cè)酸乳中的葡糖醋桿菌,并確定其檢出限,在建立的HDA體系中對(duì)酸乳中多種菌株進(jìn)行擴(kuò)增和電泳檢測(cè),驗(yàn)證方法的特異性。結(jié)果表明:用HDA法檢測(cè)酸乳中葡糖醋桿菌,得到了與設(shè)計(jì)序列長(zhǎng)度(101 bp)一致的基因片段,檢出限為102 CFU/g,反應(yīng)體系中UvrD解旋酶和T4 gp32的適宜添加量分別為0.1μg和5.0μg。該方法用于檢測(cè)酸乳中葡糖醋桿菌的靈敏度高、耗時(shí)短。
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