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犢牛盲腸微生物總DNA的提取方法
來源:食品科學(xué)網(wǎng) 閱讀量: 160 發(fā)表時(shí)間: 2012-02-21
作者: 于萍, 王加啟, 卜登攀, 鄧露芳, 劉開朗, 魏宏陽, 周凌云,
關(guān)鍵詞: 犢牛盲腸微生物; 細(xì)菌總DNA; PCR擴(kuò)增; 超聲波細(xì)胞破碎; 反復(fù)珠磨法;
摘要:

采用反復(fù)凍融法、玻璃珠法和超聲波+反復(fù)珠磨的方法提取犢牛盲腸的微生物總DNA,并對(duì)以上三種方法進(jìn)行比較,從中確定最佳的方法,以實(shí)現(xiàn)普通實(shí)驗(yàn)條件下成功提取符合PCR擴(kuò)增要求的DNA。經(jīng)紫外分光光度分析表明,超聲波+反復(fù)珠磨的方法所得的DNA的A260/A280的比值為1.81,0.8%瓊脂糖凝膠電泳結(jié)果顯示,所提DNA片段分子量大于20 kb,適于酶解和PCR擴(kuò)增要求。以提取的DNA樣品為模板,利用細(xì)菌通用引物,對(duì)其16S rDNA進(jìn)...

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