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過表達(dá)去飽和酶基因?qū)Υ竽c桿菌脂肪酸合成的影響
來源:導(dǎo)入 閱讀量: 261 發(fā)表時(shí)間: 2024-02-20
作者: 葉景,許思遠(yuǎn),張琴,錢程,曹娟娟,趙沛
關(guān)鍵詞: 去飽和酶;過表達(dá);共表達(dá);大腸桿菌;脂肪酸
摘要:

為獲得高效產(chǎn)油脂工程菌株,在大腸桿菌(Escherichia coli)BL21(DE3)中表達(dá)了來自產(chǎn)油核桃內(nèi)生菌枯草芽孢桿菌(Bacillus subtilis)HB1310的去飽和酶基因,構(gòu)建了單基因表達(dá)菌株BL21(DE3)/pET-de1、BL21(DE3)/pET-de2及共表達(dá)菌株BL21(DE3)/pET-de。結(jié)果表明,去飽和酶基因在E. coli BL21(DE3)中實(shí)現(xiàn)了高水平的表達(dá),3 株工程菌的酶活性在60 h誘導(dǎo)過程中均高于野生菌株,尤以24 h的酶活性最高,分別為同時(shí)刻野生菌株的1.38、1.48 倍和1.75 倍。外源去飽和酶基因的過表達(dá)可引起E. coli中油脂產(chǎn)量和脂肪酸組分的變化,與野生菌相比,3 株工程菌的油脂產(chǎn)量有較大提高,其發(fā)酵24 h的油脂產(chǎn)量分別可達(dá)0.57、0.58、0.72 g/L,其中,飽和脂肪酸含量分別提高72.26%、66.93%、123.21%,不飽和脂肪酸含量分別提高112.18%、44.18%、134.30%。本研究可為產(chǎn)油脂工程菌的開發(fā)和應(yīng)用提供有價(jià)值的菌種來源。

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