建立乳粉中6S-5-甲基四氫葉酸鈣的反相高效液相色譜分析方法。使用三氯乙酸溶液沉淀蛋白,抗壞血酸溶液加熱提取后,以C18反相色譜柱分離,三氟乙酸溶液(0.1%)-甲醇為流動(dòng)相,采用梯度方式洗脫,檢測波長280 nm,單標(biāo)法定量。結(jié)果表明:乳粉樣品中6S-5-甲基四氫葉酸鈣的定量限為150 μg/100 g,檢出限為50 μg/100 g;乳粉中6S-5-甲基四氫葉酸鈣的添加量為150~600 μg/100 g時(shí),加標(biāo)回收率為95.0%~109.1%,相對標(biāo)準(zhǔn)偏差為1.26%~4.04%。本方法操作簡便、準(zhǔn)確、回收率高、重復(fù)性好,適用于乳粉中6S-5-甲基四氫葉酸鈣的含量測定。
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