以牛肌管細(xì)胞為研究對象,通過添加白藜蘆醇探究其對牛肌管細(xì)胞肌纖維類型轉(zhuǎn)化的影響及其作用機(jī)制。通過噻唑藍(lán)法和比色法對細(xì)胞活力和相關(guān)代謝酶活力進(jìn)行測定,對成肌調(diào)節(jié)因子、肌球蛋白重鏈(myosin heavy chains,MyHCs)以及線粒體生物發(fā)生相關(guān)分子的基因和蛋白表達(dá)量進(jìn)行測定。結(jié)果表明,白藜蘆醇處理顯著提高了Myf5、Myf6、MyoG和MyoD的基因表達(dá)水平(P<0.05),促進(jìn)了牛肌管細(xì)胞分化。白藜蘆醇處理顯著提高了慢肌纖維蛋白(slow MyHC)的表達(dá),降低了快肌纖維蛋白(fast MyHC)表達(dá),同時上調(diào)了MyHC I和MyHC IIa基因表達(dá)水平,下調(diào)了MyHC IIx和MyHC IIb基因表達(dá)水平(P<0.05)。白藜蘆醇還能顯著提高牛肌管細(xì)胞中的琥珀酸脫氫酶和蘋果酸脫氫酶活性,降低乳酸脫氫酶活性(P<0.05),此外,白藜蘆醇顯著提高了沉默信息調(diào)節(jié)因子1(silent information regulator 1,SIRT1)、過氧化物酶體增殖物激活受體γ共激活因子1α(peroxisome proliferator-activated receptor-gamma coactivator-1α,PGC-1α)、核呼吸因子(nucleus respiratory factors,NRF)-1、線粒體轉(zhuǎn)錄因子A(mitochondrial transcription factor A,TFAM)的基因和蛋白表達(dá)水平(P<0.05)。添加SIRT1抑制劑6-氯-2,3,4,9-四氫-1H-咔唑-1-甲酰胺(1H-carbazole-1-carboxam,EX527)后,顯著削弱了白藜蘆醇誘導(dǎo)的肌纖維類型轉(zhuǎn)化(P<0.05),白藜蘆醇對SIRT1、PGC-1α、NRF-1和TFAM的基因和蛋白表達(dá)的促進(jìn)作用被EX527顯著削弱(P<0.05)。綜上所述,白藜蘆醇通過激活SIRT1/PGC-1α信號通路促進(jìn)線粒體生物發(fā)生,進(jìn)而促進(jìn)牛肌管肌纖維類型的轉(zhuǎn)化。
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