目的:探討羅伊氏乳桿菌對(duì)腸上皮細(xì)胞炎癥反應(yīng)和凋亡的作用及相關(guān)機(jī)制。方法:通過(guò)免疫熒光和酶聯(lián)免疫吸附檢測(cè)羅伊氏乳桿菌對(duì)腸上皮細(xì)胞炎癥反應(yīng)和凋亡的影響;采用生物信息學(xué)分析、定量聚合酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng)和雙熒光素酶報(bào)告基因等實(shí)驗(yàn)篩選羅伊氏乳桿菌發(fā)揮作用的下游微小核糖核酸(microRNA,miRNA);通過(guò)雙熒光素酶報(bào)告基因和Western blot等實(shí)驗(yàn)篩選miR-196a下游靶基因及其功能。結(jié)果:羅伊氏乳桿菌能夠抑制脂多糖引起的腸上皮細(xì)胞炎癥反應(yīng)和凋亡,進(jìn)一步分析發(fā)現(xiàn)羅伊氏乳桿菌通過(guò)上調(diào)腸上皮細(xì)胞miR-196a抑制細(xì)胞炎癥和凋亡,miR-196a通過(guò)靶向抑制程序性細(xì)胞死亡因子4(programmed cell death 4,PDCD4)基因表達(dá)發(fā)揮對(duì)腸上皮細(xì)胞的保護(hù)作用。結(jié)論:羅伊氏乳桿菌通過(guò)miR-196a靶向抑制PDCD4基因表達(dá),減緩腸上皮細(xì)胞炎癥反應(yīng)和凋亡。
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