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基于衍生化3-氨基-2-惡唑烷酮的夾心酶聯(lián)免疫分析
來(lái)源:導(dǎo)入 閱讀量: 116 發(fā)表時(shí)間: 2024-04-29
作者: 張世偉,吳會(huì)玲,周迎春,王炳志,楊星星,杜業(yè)剛,湯璐,馮榮虎,郭繼平
關(guān)鍵詞: 3-氨基-2-惡唑烷酮;夾心酶聯(lián)免疫分析;表位間隔距離;辣根過(guò)氧化物酶標(biāo)記親和素
摘要:

建立一種3-氨基-2-惡唑烷酮(3-amino-2-oxazolidinone,AOZ)夾心免疫檢測(cè)方法。通過(guò)1,6-己二醇連接2-硝基-4-羧基苯甲醛和生物素合成針對(duì)AOZ的新型衍生試劑。在樣品前處理時(shí)加入衍生試劑可對(duì)AOZ進(jìn)行衍生,衍生產(chǎn)率為89%。在酶標(biāo)板上包被抗AOZ單克隆抗體并以辣根過(guò)氧化物酶標(biāo)記的親和素或抗生物素抗體作為第二結(jié)合物可實(shí)現(xiàn)AOZ的夾心酶聯(lián)免疫吸附檢測(cè)(enzyme-linked immunosorbnent assay,ELISA)。從實(shí)際應(yīng)用的角度,得到雙抗夾心和抗體-親和素夾心模式下兩個(gè)表位的極限距離,分別為12 ?和13 ?,理想距離分別為16 ?和17 ?。在雙抗夾心和抗體-親和素夾心模式下的檢出限分別達(dá)到1.8 pg/mL和0.8 pg/mL(以AOZ質(zhì)量濃度計(jì)),相對(duì)于競(jìng)爭(zhēng)ELISA,其靈敏度最高提高了25 倍。平均回收率為73%~85%,平均相對(duì)標(biāo)準(zhǔn)偏差為9.0%。

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