為研究暗褐脈柄牛肝菌多糖的結(jié)構(gòu)特性及生物活性,本研究以暗褐脈柄牛肝菌子實(shí)體為研究對(duì)象,采用水提醇沉法制備粗多糖,Sevag試劑脫蛋白,大孔吸附樹(shù)脂脫色,DEAE-52纖維素柱色譜分離,丙烯葡聚糖凝膠S-400HR純化制備均一多糖。采用高效凝膠滲透法測(cè)定分子質(zhì)量、PMP柱前衍生法結(jié)合高效液相色譜測(cè)定單糖組成、紫外光譜分析是否含蛋白或核酸、紅外光譜分析官能團(tuán)種類、核磁共振波譜初步分析多糖的結(jié)構(gòu),掃描電子顯微鏡觀察多糖的形貌。利用α-葡萄糖苷酶抑制實(shí)驗(yàn)篩選出活性較好的多糖組分并進(jìn)一步研究其酶動(dòng)力學(xué),初步闡明暗褐脈柄牛肝菌多糖的體外降血糖作用機(jī)制和類型。結(jié)果表明,篩選的4 種大孔樹(shù)脂(HP 2MGL、HP 20、SP 850、SP 825)中,SP 825大孔樹(shù)脂綜合脫色效果最好;活性組分(PPP-0)重均分子質(zhì)量為31 059 Da,含有α和β構(gòu)型糖苷鍵,是一種由半乳糖Gal、葡萄糖Glc、巖藻糖Fuc、甘露糖Man組成的雜多糖;體外降血糖活性實(shí)驗(yàn)表明粗多糖和3 種均一多糖組分均對(duì)α-葡萄糖苷酶有抑制作用,其中PPP-2抑制率最高,PPP-0次之,且在酶動(dòng)力學(xué)上屬于競(jìng)爭(zhēng)性可逆抑制。本研究可為暗褐脈柄牛肝菌多糖在降血糖相關(guān)功能食品和藥品方面的開(kāi)發(fā)提供理論依據(jù)。
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