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香辛料SYBR GREEN I染料實時聚合酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng)檢測方法的建立及應(yīng)用
來源:導(dǎo)入 閱讀量: 101 發(fā)表時間: 2024-08-04
作者: 楊晴麗,王仁靜,張茹,孟憲卓,姚幫本,陳趙然,張旭,方建軍,陳偉
關(guān)鍵詞: 香辛料;SYBR?GREEN?I染料;實時聚合酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng);檢測
摘要:

目的:本研究致力于建立香辛料真實性成分的分子鑒定方法,為香辛料的摻假提供有效的鑒定和檢測方法,在不同的使用條件下分別實現(xiàn)定性或半定量分析,為建立相關(guān)標(biāo)準(zhǔn)提供一定的基礎(chǔ)技術(shù)支撐。方法:研究采用SYBR GREEN I染料實時聚合酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng)(polymerase chain reaction,PCR)方法,通過設(shè)計特異性引物成功建立了特異性檢測八角、茴香、胡椒和花椒的分析技術(shù)。結(jié)果:該方法能夠特異性檢測出八角、茴香、胡椒、花椒,Ct值在標(biāo)準(zhǔn)品體積分?jǐn)?shù)0.001%~10%范圍內(nèi)線性關(guān)系良好。針對八角標(biāo)準(zhǔn)品,檢測限為1%;針對茴香、花椒、胡椒標(biāo)準(zhǔn)品,最檢測限均為0.001%。利用該方法對5 份實際樣本進(jìn)行檢測,分別在樣本1中未檢測出八角、茴香、胡椒、花椒;樣本2、3、5中檢測出八角、茴香、胡椒;樣本4中檢測出八角、茴香、胡椒、花椒。結(jié)論:本實驗建立的SYBR GREEN I染料實時PCR方法靈敏度高、重復(fù)性好,可應(yīng)用于實際樣品的檢測。

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