雞蛋清中主要蛋白質(zhì)均為糖蛋白,經(jīng)胃腸消化后將在消化道內(nèi)產(chǎn)生大量糖肽,這些糖肽的結(jié)構(gòu)需要被鑒定和明確。本研究采用胰蛋白酶將雞蛋清消化,然后從水解物中通過親水相互作用層析富集N-糖肽、以Retain AX層析結(jié)合AminoLink樹脂吸附富集O-糖肽,運(yùn)用液相色譜-質(zhì)譜聯(lián)用技術(shù)對(duì)糖肽結(jié)構(gòu)進(jìn)行解析,并借助生物信息學(xué)分析探究蛋清糖蛋白對(duì)腸道的潛在作用。經(jīng)質(zhì)譜解析,共鑒定到來自于49 種N-糖蛋白的1 720 個(gè)N-糖肽結(jié)構(gòu),以及來自29 種O-糖蛋白的565 個(gè)O-糖肽結(jié)構(gòu)。其中,卵黏蛋白糖肽結(jié)構(gòu)最為多樣,共有490 個(gè)N-糖肽結(jié)構(gòu)和216 個(gè)O-糖肽結(jié)構(gòu)。京都基因與基因組百科全書通路富集分析發(fā)現(xiàn),含唾液酸修飾的N-糖蛋白主要涉及白細(xì)胞介素-17信號(hào)通路和鐵死亡,而含唾液酸修飾的O-糖蛋白主要涉及膽固醇代謝、維生素消化吸收、低氧誘導(dǎo)因子-1信號(hào)通路和腎素-血管緊張素系統(tǒng)。本研究系統(tǒng)解析了雞蛋清蛋白質(zhì)的糖肽結(jié)構(gòu),為后續(xù)探究蛋清糖肽對(duì)腸道的潛在作用提供了重要的結(jié)構(gòu)信息。
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