在細(xì)胞水平上探討玉米肽對酒精損傷PC12細(xì)胞的保護(hù)作用及可能機(jī)制。首先建立酒精損傷細(xì)胞模型,對玉米肽的作用劑量進(jìn)行篩選;采用酶聯(lián)免疫吸附試劑盒法測定玉米肽預(yù)處理后PC12細(xì)胞中氧化應(yīng)激指標(biāo)(谷胱甘肽(glutathione,GSH)、超氧化物歧化酶(superoxide dismutase,SOD)、丙二醛(malondialdehyde,MDA))、炎癥相關(guān)因子(腫瘤壞死因子-α(tumor necrosis factor-α,TNF-α)、白細(xì)胞介素-6(interleukin-6,IL-6)、核因子-κB(nuclear factor-κB,NF-κB))、神經(jīng)營養(yǎng)因子(神經(jīng)生長因子(nerve growth factor,NGF)、腦源性神經(jīng)營養(yǎng)因子(brain-derived neurotrophic factor,BDNF))、突觸可塑性相關(guān)蛋白(突觸后致密物質(zhì)-95(postsynaptic density-95,PSD-95)、生長相關(guān)蛋白-43(growth-associated protein-43,GAP-43)、突觸素(synaptophysin,SYN))等指標(biāo)。通過細(xì)胞存活率和形態(tài)變化,選擇400 mmol/L為酒精損傷的最適濃度,確定玉米肽劑量低、中、高質(zhì)量濃度為25、100、400 μg/mL;實驗結(jié)果表明3 個劑量組的玉米肽對酒精損傷的PC12細(xì)胞存活率都具有顯著的提高作用;氧化應(yīng)激指標(biāo)發(fā)現(xiàn)玉米肽可提高酒精損傷PC12細(xì)胞中GSH和SOD含量、抑制MDA的生成;炎癥相關(guān)指標(biāo)測定結(jié)果表明玉米肽可降低酒精損傷PC12細(xì)胞中炎癥因子TNF-α和IL-6的水平,抑制乙醇導(dǎo)致的NF-κB含量升高;對神經(jīng)營養(yǎng)因子含量的測定表明玉米肽還可提高酒精損傷細(xì)胞中NGF和BDNF的含量;此外玉米肽還可以增加突觸可塑性相關(guān)蛋白PSD-95和GAP-43的含量,但對SYN無改善作用。總體來看,玉米肽對酒精損傷PC12細(xì)胞具有保護(hù)作用,其保護(hù)作用機(jī)制為多種途徑共同作用的結(jié)果。
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