肉葡萄球菌(Staphylococcus carnosus)、木糖葡萄球菌(S. xylosus)、腐生葡萄球菌(S. saprophyticus)、表皮葡萄球菌(S. epidermidis)、馬胃葡萄球菌(S. equorum)和松鼠葡萄球菌(S. sciuri)是發(fā)酵肉制品中常見的葡萄球菌,為準(zhǔn)確、快速地檢測和鑒定這些菌種,建立6?種葡萄球菌的多重聚合酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng)(polymerase chain reaction,PCR)方法并進(jìn)行驗證。以上述菌種的gap、rpoB、SodA和SNc為靶基因,設(shè)計和篩選菌種特異性引物6?對,優(yōu)化PCR體系,建立6?種葡萄球菌的多重PCR鑒定方法。實驗結(jié)果顯示多重PCR的基因組DNA檢測靈敏度可達(dá)到4?pg,活菌檢測靈敏度可達(dá)到2×102?CFU;采用建立的多重PCR方法對傳統(tǒng)肉制品中分離的8?株葡萄球菌進(jìn)行鑒定,結(jié)果與16S rDNA序列分析、生理生化鑒定結(jié)果一致。建立的多重PCR方法具有較高的種間特異性,可快速、準(zhǔn)確地用于發(fā)酵肉制品中肉葡萄球菌、木糖葡萄球菌、表皮葡萄球菌、馬胃葡萄球菌、松鼠葡萄球菌和腐生葡萄球菌的檢測和鑒定,具有較好的應(yīng)用前景。
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