領(lǐng)學(xué)術(shù)科研之先，創(chuàng)食品科技之新
—— 中國食品雜志社
采用微生物分離培養(yǎng)與分子鑒定相結(jié)合的方法，在對酒曲中的酵母菌進(jìn)行分離、純化和形態(tài)學(xué)鑒定基礎(chǔ)上，進(jìn)行菌株核糖體26S rDNA聚合酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng)-限制性片段長度多態(tài)性分析技術(shù)結(jié)合的分子鑒定。并采用非培養(yǎng)方法，直接提取酒曲中的總DNA進(jìn)行聚合酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng)擴(kuò)增、電泳和切膠與回收，通過聚合酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng)-變性梯度凝膠電泳（polymerase chain reaction-denaturing gradient gel electrophoresis，PCR-DGGE）法鑒定酵母菌。結(jié)果表明，采用培養(yǎng)方式分離到57?株6?種不同形態(tài)的酵母菌，經(jīng)鑒定為5?種分子類型，分別為奧默畢赤酵母（Pichia kudriavzevii）、葡萄牙棒孢酵母（Clavispora lusitaniae）、異常威克漢姆酵母（Wickerhamomyces anomalus）、膠紅酵母（Rhodotorula mucilaginosa）、阿氏絲孢酵母（Trichosporon asahii）。經(jīng)PCR-DGGE法鑒定得到10 株酵母菌，分別為W. anomalus、Wickerhamomyces sp.、T. asahii、熱帶假絲酵母（Candida tropicalis）和Candida sp.各1 株，Hyphopichia burtonii 2?株，另有uncultured Saccharomycopsis 3?株。培養(yǎng)與非培養(yǎng)兩種方式共鑒定得到10 株酵母菌，分別屬于8?個屬，包括P. kudriavzevii、C. lusitaniae、W. anomalus、R. mucilaginosa、T. asahii、uncultured Saccharomycopsis、H. burtonii、Wickerhamomyces sp.、C. tropicalis、Candida sp.，該研究結(jié)果可為進(jìn)一步研究酒曲的發(fā)酵能力提供參考。
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