建立超高效液相色譜-串聯(lián)質(zhì)譜(ultra-high performance liquid chromatography-tandem mass spectrometry,UPLC-MS/MS)檢測食品中雞蛋過敏原卵白蛋白的方法。蛋清經(jīng)胰蛋白酶酶解、超濾凈化,經(jīng)Easy-nLC 1000納升液相色譜-四極桿-靜電場軌道阱高分辨質(zhì)譜以乙腈-0.1%甲酸溶液作為流動相進行分離,結(jié)合Uniprot數(shù)據(jù)庫篩選出特異性好且靈敏度高的特征肽段GGLEPINFQTAADQAR(GR-16)作為外標,采用UPLC-MS/MS正離子源多反應監(jiān)測模式對實際樣品進行檢測。結(jié)果表明,該方法在5~5?000?ng/mL范圍內(nèi)線性良好,定量限為0.1?μg/g,平均回收率在77.22%~98.55%之間,相對標準偏差不大于9.97%。此方法特異性高、靈敏度好、分析速度快,可為食品中雞蛋過敏原的檢測提供技術(shù)支持。
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