研究不同質(zhì)量濃度花青素與大豆分離蛋白在堿性條件(pH?9.0)下的共價復(fù)合,通過十二烷基硫酸鈉-聚丙烯酰胺凝膠電泳(sodium dodecyl sulfate-polyacrylamide gel electrophoresis,SDS-PAGE)、熒光光譜、圓二色光譜對復(fù)合產(chǎn)物的結(jié)構(gòu)進(jìn)行分析,并建立以脂多糖誘導(dǎo)的Raw264.7炎癥細(xì)胞模型探究大豆分離蛋白對花青素抗炎能力的影響。結(jié)果表明,花青素質(zhì)量濃度升高會導(dǎo)致大豆分離蛋白溶解度降低,主要猝滅機(jī)制為靜態(tài)猝滅,二級結(jié)構(gòu)中α-螺旋含量逐漸降低,β-折疊與無規(guī)則卷曲含量逐漸增加。當(dāng)花青素質(zhì)量濃度為1.000?mg/mL可通過SDS-PAGE觀察到超大分子質(zhì)量亞基的生成。大豆分離蛋白-花青素復(fù)合物劑量為200?μg/mL時,當(dāng)復(fù)合物體系花青素的添加質(zhì)量濃度大于0.167?mg/mL,可以明顯降低細(xì)胞分泌腫瘤壞死因子TNF-α以及NO的濃度。
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