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AccQ-Tag柱前衍生反相高效液相色譜法測定谷物及食糜中氨基酸含量
來源:食品科學(xué)網(wǎng) 閱讀量: 130 發(fā)表時(shí)間: 2019-09-26
作者: 韓粉麗,韓 飛,李愛科,陳曦,宋歌,范柳萍,余治權(quán)
關(guān)鍵詞: 反相高效液相色譜法|AccQ-Tag柱前衍生|谷物|食糜|氨基酸
摘要:

用AccQ-Tag法測定不同谷物及食糜中氨基酸的含量,并優(yōu)化原料與酸解劑的比例。采用內(nèi)標(biāo)法定量,6-氨基喹啉基-N-羥基琥珀酰亞氨基甲酸酯為柱前衍生劑,用反相高效液相色譜儀,2475熒光檢測器(激發(fā)波長250nm、發(fā)射波長395nm),Waters AccQ-Tag Nova-PakTMC18柱(3.9mm×150mm,4μm),柱溫37℃,以醋酸鈉(pH4.95)緩沖液為流動(dòng)相A,純乙腈為流動(dòng)相B,水為流動(dòng)相C進(jìn)行梯度洗脫,進(jìn)樣量為10μL。結(jié)果發(fā)現(xiàn),5mg原料的最優(yōu)酸解劑為500μL;17種氨基酸線性回歸方程在25~500μmol/L范圍內(nèi)線性良好(胱氨酸(Cys)濃度在12.5~250μmol/L之間),相關(guān)系數(shù)r為0.9996~0.9999,測定的平均回收率為97.56%~103.92%(n=3),相對標(biāo)準(zhǔn)偏差為0.31%~2.75%(n=3)。本法快速簡便,能夠適用于谷物及食糜中氨基酸含量的測定。

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