目的:研究葡萄籽原花青素提取物(grape seed proanthocyanidin extract,GSPE)對(duì)砷誘導(dǎo)的人肝細(xì)胞 HL-7702損傷的保護(hù)作用及其機(jī)制,為砷中毒的防治和GSPE的抗氧化研究提供理論依據(jù)。方法:將人肝細(xì)胞HL-7702 分為對(duì)照組、砷染毒組(25 μmol/L)、GSPE干預(yù)組(5、10、25、50 mg/L)以及GSPE單獨(dú)干預(yù)組(50 mg/L), 分別處理24 h和48 h后,分別測(cè)定天門冬氨酸氨基轉(zhuǎn)移酶(aspartate transaminase,AST)、丙氨酸氨基轉(zhuǎn)移酶 (alanine aminotransferase,ALT)、谷胱甘肽(glutathione,GSH)、超氧化物歧化酶(superoxide dismutase, SOD)和丙二醛(malondialdehyde,MDA)水平以及總抗氧化能力(total antioxidant capacity,T-AOC)變化。噻 唑藍(lán)(3-(4,5)-dimethylthiahiazo(-z-yl)-3,5-di-phenytetrazoliumromide,MTT)法分析細(xì)胞生存率,利用實(shí)時(shí)定量聚 合酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng)以及Western blot法檢測(cè)HL-7702細(xì)胞中核因子E2相關(guān)因子(nuclear factor erythroid-2 related factor 2, Nrf2)、血紅素氧合酶1(heme oxygenase 1,HO-1)、醌氧化還原酶1(quinone oxidoreductase 1,NQO1)和谷 胱甘肽巰基轉(zhuǎn)移酶(glutathione S-transferase,GST)的mRNA以及蛋白表達(dá)。結(jié)果:MTT實(shí)驗(yàn)發(fā)現(xiàn),與對(duì)照組比 較,高濃度砷(≥25 μmol/L)染毒組細(xì)胞存活率顯著降低(P<0.05)。GSPE干預(yù)組(>10 mg/L)細(xì)胞中的ALT 和AST活力、MDA水平顯著低于砷染毒組(P<0.05),SOD活力、GSH含量以及T-AOC水平顯著高于砷染毒組 (P<0.05),GSPE干預(yù)組HL-7702細(xì)胞中Nrf2、HO-1、NQO1、GST的mRNA及蛋白表達(dá)增高(P<0.05)。結(jié) 論:GSPE對(duì)砷誘導(dǎo)的人肝細(xì)胞HL-7702氧化損傷具有拮抗作用,且具有一定的劑量效應(yīng)關(guān)系,其機(jī)制可能是通過 激活Nrf2介導(dǎo)的抗氧化信號(hào)通路,提高細(xì)胞抗氧化能力,從而改善砷引起的肝損傷。
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