領(lǐng)學(xué)術(shù)科研之先,創(chuàng)食品科技之新
—— 中國食品雜志社
期刊集群
谷氨酸棒狀桿菌果糖代謝阻斷工程菌的構(gòu)建
來源:食品科學(xué)網(wǎng) 閱讀量: 174 發(fā)表時(shí)間: 2017-06-07
作者: 許湄雪,王北辰,劉金雷,范 榮,陸 浩,韓武洋,李天明,馮惠勇
關(guān)鍵詞: 谷氨酸棒狀桿菌;基因敲除;磷酸烯醇式丙酮酸-糖磷酸轉(zhuǎn)移酶系統(tǒng)
摘要:

谷氨酸棒狀桿菌不僅可以利用葡萄糖和果糖作為碳源進(jìn)行糖類代謝,也可以利用這些碳源作為底物生產(chǎn)葡萄糖酸、甘露醇及山梨醇等產(chǎn)品。為了提高底物利用率和目的產(chǎn)物的積累量,利用代謝工程阻斷糖類代謝的磷酸烯醇式丙酮酸-糖磷酸轉(zhuǎn)移酶系統(tǒng)(phosphoenolpyruvate carbohydrate phosphotransferase system,PTS)和失活相應(yīng)磷酸激酶。是實(shí)現(xiàn)此目標(biāo)的有效手段。本實(shí)驗(yàn)利用同源重組和反向篩選等技術(shù)手段,分別獲得ptsF單基因缺失工程菌CGδptsF和ptsF、ptsH、ptsI三基因缺失工程菌CGδptsFδptsHδptsI。工程菌的生長情況研究表明:在以葡萄糖為唯一碳源的培養(yǎng)基上,工程菌CGδptsF和工程菌CGδptsFδptsHδptsI與野生型生長情況基本一致,說明葡萄糖代謝不受3 個(gè)基因影響;在以蔗糖為唯一碳源的培養(yǎng)基上,工程菌CGδptsF和工程菌CGδptsFδptsHδptsI的生長速率分別是野生型的48.4%和29.7%,菌體濃度分別是野生型的61.6%和34.1%;在以果糖為唯一碳源的培養(yǎng)基上,工程菌CGδptsF菌體濃度是野生型43.2%,工程菌CGδptsFδptsHδptsI生長為0,證明其完全阻斷了果糖代謝,同時(shí)說明果糖的PTS系統(tǒng)受ptsF、ptsH和ptsI基因編碼的PTS相關(guān)蛋白的聯(lián)合控制。果糖代謝阻斷工程菌的獲得,為進(jìn)一步構(gòu)建以果糖原型為底物的甘露醇或山梨醇生產(chǎn)工程菌株提供了遺傳資源,也為谷氨酸棒狀桿菌的糖類代謝研究提供了理論依據(jù)。

電話: 010-87293157 地址: 北京市豐臺(tái)區(qū)洋橋70號(hào)

版權(quán)所有 @ 2023 中國食品雜志社 京公網(wǎng)安備11010602060050號(hào) 京ICP備14033398號(hào)-2

陇西县| 高台县| 洪江市| 裕民县| 共和县| 应用必备| 钟山县| 台安县| 西乌珠穆沁旗| 洞口县| 汉源县| 北票市| 新平| 泾源县| 白银市| 油尖旺区| 育儿| 马龙县| 灵台县| 德安县| 望江县| 屯门区| 定南县| 东光县| 开江县| 辽阳县| 铜梁县| 阿尔山市| 大足县| 治多县| 繁昌县| 德钦县| 绥棱县| 枝江市| 大关县| 依兰县| 磐安县| 古田县| 宁陵县| 化州市| 凤山县|