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—— 中國(guó)食品雜志社
環(huán)糊精葡萄糖基轉(zhuǎn)移酶（cyclodextrin glycosyltransferase，CGTase）是一種多功能酶，能夠催化淀粉生成環(huán)糊精（cyclodextrin，CD），本研究考察了Bacillus cereus的CGTase活性區(qū)域43位氨基酸與CGTase酶活力及其催化玉米淀粉形成γ-CD能力的聯(lián)系。實(shí)驗(yàn)中共構(gòu)建17 株突變株，并在大腸桿菌BL21中實(shí)現(xiàn)異源表達(dá)。結(jié)果表明：相比于原始酶，H43E、H43F、H43W、H43Y突變酶的活力均有所提高；產(chǎn)物特異性方面，除H43W突變酶外，其余突變酶的催化產(chǎn)物中γ-CD比例均有所升高，將43位組氨酸突變成脯氨酸、異亮氨酸和蘇氨酸后得到的突變酶作用于玉米淀粉，酶的催化產(chǎn)物中β-CD含量均下降，γ-CD含量由20%分別升高到30.2%、28.4%、29.2%，實(shí)際產(chǎn)量由4.76 g/L升高到7.64、6.05、6.29 g/L，由此可見Bacillus cereus的CGTase活性區(qū)域中43位氨基酸對(duì)于CGTase的活力和產(chǎn)物特異性具有重要影響。
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