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HPLC法定量分析微生物法制備液中產(chǎn)物γ-氨基丁酸和底物L(fēng)-谷氨酸
來源:食品科學(xué)網(wǎng) 閱讀量: 164 發(fā)表時(shí)間: 2017-06-07
作者: 朱廣躍,楊 衛(wèi),吳 健,馬翠云,趙 毅,吳 笛,高小雪,戴桂馥
關(guān)鍵詞: 高效液相色譜;微生物制備液;γ-氨基丁酸;L-谷氨酸;氯甲酰芴甲酯
摘要:

建立一種測定微生物法制備液中γ-氨基丁酸(γ-aminobutyric acid,GABA)和L-谷氨酸(L-glutamic,L-Glu)的高效液相色譜法。樣品經(jīng)10%三氯乙酸溶液預(yù)處理后,用4 mmol/L氯甲酰芴甲酯進(jìn)行柱前衍生。采用Phenomenex C18色譜柱(4.6 mm×250 mm,5 μm),以A [50 mmol/L乙酸鈉溶液(pH 4.8)-甲醇-乙腈-四氫呋喃(82∶8.5∶8.5∶1,V/V)]∶B[50 mmol/L乙酸鈉溶液(pH 4.8)-甲醇-乙腈-四氫呋喃(22∶38.5∶38.5∶1,V/V)]=30∶70為流動(dòng)相,流速1.0 mL/min,柱溫40 ℃洗脫,檢測波長265 nm。該方法穩(wěn)定、靈敏、測定周期短、重復(fù)性好。在GABA和L-Glu質(zhì)量濃度為20~400 μg/mL范圍內(nèi)有良好的線性關(guān)系。與常用衍生劑鄰苯二甲醛相比,衍生產(chǎn)物的穩(wěn)定性更好,且無需梯度洗脫。

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