目的:優(yōu)化大吳風(fēng)草總黃酮(total flavonoids of Farfugium,TFF)雙水相萃取體系并研究其抑菌活性。方法:超聲波輔助C2H5OH-(NH4)2SO4雙水相萃取TFF,依據(jù)Box-Behnken試驗(yàn)設(shè)計(jì)原理,采用三因素三水平響應(yīng)面分析法,以TFF萃取率為響應(yīng)值進(jìn)行方差分析,獲取多元二次線性回歸方程;采用K-B紙片擴(kuò)散法測(cè)定6 種供試菌種的抑菌圈直徑,對(duì)比最小抑菌濃度(minimum inhibitory concentration,MIC)和最小殺菌濃度(minimumbactericidal concentration,MBC)確定其抑菌活性。結(jié)果:24% C2H5OH-18% (NH4)2SO4雙水相萃取體系條件下TFF萃取率最高,響應(yīng)面試驗(yàn)方差分析表明,粗提液質(zhì)量分?jǐn)?shù)顯著影響TFF萃取率(P=0.023 9<0.05),而pH值和NaCl質(zhì)量分?jǐn)?shù)對(duì)萃取率的影響不顯著;最佳雙水相萃取條件為粗提液質(zhì)量分?jǐn)?shù)20%、pH 7.64、NaCl質(zhì)量分?jǐn)?shù)2.68%,萃取率模型預(yù)測(cè)最大值為96.366 7%(P=0.994);TFF對(duì)枯草芽孢桿菌抑制作用最強(qiáng),高劑量作用下抑菌率可達(dá)98.67%,MIC為1.56 mg/mL;對(duì)沙門氏菌、金黃色葡萄球菌和大腸桿菌抑制作用次之,對(duì)青霉和黑曲霉抑制作用最弱。結(jié)論:粗提液質(zhì)量分?jǐn)?shù)對(duì)萃取率影響較大,pH值和NaCl質(zhì)量分?jǐn)?shù)對(duì)萃取率的影響較小;TFF對(duì)6 種供試菌種均表現(xiàn)出較強(qiáng)的抑菌活性,抑菌率與TFF質(zhì)量濃度呈正相關(guān),TFF對(duì)細(xì)菌的抑制效果相對(duì)強(qiáng)于真菌。
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