為獲得具有抗噬菌體功能且發(fā)酵性能優(yōu)良的乳酸菌融合子,采用單親滅活及正交分析方法,研究了保加利亞乳桿菌與嗜熱鏈球菌抗噬菌體菌株的原生質(zhì)體制備及融合條件。結(jié)果表明:保加利亞乳桿菌原生質(zhì)體制備的最適條件是以磷酸鹽緩沖液和甘露醇制作的高滲溶液為原生質(zhì)體穩(wěn)定劑,1.0 mg/mL的溶菌酶36 ℃處理30 min,原生質(zhì)體的形成率為(89.02±2.31)%,再生率為(4.62±0.22)%。嗜熱鏈球菌抗噬菌體菌株原生質(zhì)體制備的最適條件是以Tris-HCl和蔗糖制作的高滲溶液為原生質(zhì)體穩(wěn)定劑,0.1 mg/mL的溶菌酶42 ℃處理30 min,原生質(zhì)體的形成率為(99.15±0.23)%,再生率為(5.79±0.17)%。單親滅活保加利亞乳桿菌與嗜熱鏈球菌抗噬菌體菌株原生質(zhì)體融合的最適條件為聚乙二醇6000(質(zhì)量濃度為400 g/L,添加0.01 mol/L CaCl2、0.02 mol/L MgCl2)40 ℃促融2 min,融合率可達(dá)(1.85±0.12)×10-6。所得融合子各項(xiàng)性能優(yōu)良,適合于酸奶生產(chǎn)。
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