為提高小米糠的附加值,本實(shí)驗(yàn)以多個(gè)枯草芽孢桿菌為起始菌株,透明圈直徑與菌落直徑之比(HC值)為初篩指標(biāo),通過酪蛋白平板培養(yǎng)法進(jìn)行高產(chǎn)蛋白酶菌株的初步篩選。將初篩所獲得菌株在小米糠基礎(chǔ)培養(yǎng)基上進(jìn)行發(fā)酵,對(duì)其發(fā)酵上清液的總蛋白酶活力、多肽含量及總抗氧化能力(total antioxidant capacity,T-AOC)進(jìn)行測(cè)定,進(jìn)一步篩選出最適菌株。用此菌株對(duì)小米糠進(jìn)行發(fā)酵,并對(duì)其最適發(fā)酵時(shí)間及上清液的抗氧化活性進(jìn)行測(cè)定。結(jié)果表明:NattoD-3為最佳發(fā)酵菌株,其產(chǎn)蛋白酶活力為90.22 IU/mL,發(fā)酵小米糠72 h時(shí)所獲得發(fā)酵上清液4 種體外抗氧化活性相對(duì)最高,分別為T-AOC值38.04 U/mL、1,1-二苯基-2-三硝基苯肼(1,1-diphenyl-2-picrylhydrazyl,DPPH)自由基清除率75.37%、總還原力0.18及Fe2+螯合能力44.34%,最終發(fā)酵上清液的多肽含量為4.28 mg/mL,纖溶酶活力為522.64 IU/mL。
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