干酪乳清Alcalase 2.4L酶解的最優(yōu)條件,即酶解時(shí)間為2 h、pH 9.5、酶與底物比為4%、酶解溫度為50 ℃。利用超濾、葡聚糖凝膠層析和三羥甲基氨基甘氨酸-十二烷基硫酸鈉-聚丙烯酰胺凝膠電泳(tricine-sodiumdodecyl sulfate-polyacrylamide gelelectrophoresis,tricine SDS-PAGE)等方法從干酪乳清中提取抗氧化性蛋白肽。分別考察操作壓力、料液溫度、料液pH值、操作時(shí)間對(duì)超濾膜膜通量的影響。乳清酶解物超濾的最佳條件為:壓力0.25 MPa、溫度30 ℃、時(shí)間120 min、初始pH 9.0。分子質(zhì)量4 000~6 000 D肽的水解液脂質(zhì)過(guò)氧化抑制率最高,達(dá)到47.28%。利用Sephadex G-50型葡聚糖凝膠進(jìn)行純化,將分離的組分進(jìn)行Tricine-SDS-PAGE分析和脂質(zhì)過(guò)氧化抑制率的測(cè)定。第34管洗脫液的脂質(zhì)過(guò)氧化抑制率最高,分子質(zhì)量范圍為4 000~4 100 D。
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