目的:分離和鑒定羊羔美酒大曲中的乳酸菌,探尋其菌群多樣性,為釀酒工藝條件改進(jìn)提供參考。方法:將酒曲進(jìn)行梯度稀釋、富集培養(yǎng)、平板畫(huà)線等分離純化,獲取乳酸菌單菌落。采用菌落特征和個(gè)體形態(tài)特征結(jié)合的方法進(jìn)行乳酸菌形態(tài)鑒定。乳酸菌的分子鑒定采用重復(fù)序列聚合酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng)(repetitive sequence-basedpolymerase chain reaction,Rep-PCR)技術(shù)和16S rDNA序列分析法。結(jié)果:從羊羔美酒大曲中共得到65 株乳酸菌,形態(tài)學(xué)分為9 類(lèi)。用Rep-PCR技術(shù)在75%的相似性上將其區(qū)分為5 類(lèi),經(jīng)基因序列分析,鑒定為分屬于4 個(gè)屬的乳酸菌,分別為:片球菌屬(Pediococcus)、明串珠菌屬(Leuconostoc)、乳桿菌屬(Lactobacillus)、腸球菌屬(Enterococcus)。結(jié)論:傳統(tǒng)微生物分離技術(shù)與現(xiàn)代分子鑒定技術(shù)相結(jié)合,可快速準(zhǔn)確鑒定出羊羔美酒大曲中乳酸菌的菌群組成和多樣性。
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