TaqMan探針實時熒光定量聚合酶鏈式反應檢測低溫酸乳中常見的霉菌和酵母
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為提高低溫酸乳中霉菌和酵母菌檢測效率,根據保守基因延伸因子1α(elongation factor 1α,EF-1α)序列分別針對霉菌與酵母菌設計引物與探針,利用實時熒光定量聚合酶鏈式反應,基于TaqMan探針分別建立霉菌和酵母菌檢測方法。以低溫酸乳中常見真菌與乳酸菌基因組DNA為擴增模板進行特異性檢驗,并對方法靈敏度與重復性進行檢驗,同時構建標準曲線。結果表明:根據EF-1α基因設計的引物與探針特異性良好;所構建的標準曲線相關系數均大于0.99;該方法檢測酵母菌的靈敏度為101?CFU/mL,檢測霉菌的靈敏度為102?CFU/mL;重復性檢驗中組內與組間的變異系數均小于2%,表明方法具有良好的可靠性與穩(wěn)定性,適用于低溫酸乳中霉菌與酵母菌的快速檢測。
閱讀量: 117 發(fā)表時間: 2024-11-06