在磷酸鹽緩沖體系(pH 7.5)中,利用紫外光譜法、熒光光譜法和圓二色譜法,結(jié)合分子模擬技術(shù)研究了桑色素對(duì)黃嘌呤氧化酶(xanthine oxidase,XO)活性的抑制機(jī)理。結(jié)果表明:桑色素是一種有效的可逆性混合型抑制劑,其半數(shù)抑制濃度(IC50)和抑制常數(shù)(Ki)分別為1.35×10–5 mol/L和1.21×10–5 mol/L;桑色素通過(guò)疏水作用力與XO形成基態(tài)復(fù)合物導(dǎo)致XO內(nèi)源熒光的猝滅,并誘導(dǎo)XO的二級(jí)結(jié)構(gòu)發(fā)生改變;分子模擬結(jié)果進(jìn)一步證實(shí)桑色素主要通過(guò)疏水作用力結(jié)合到XO的活性中心,與Phe914、Phe649、Phe1009、Leu648、Leu1014和Leu873等主要氨基酸發(fā)生作用。推測(cè)桑色素進(jìn)入XO的疏水腔,阻礙了底物黃嘌呤進(jìn)入XO活性中心并影響了XO活性中心的形成,從而抑制了XO對(duì)黃嘌呤的催化活性。
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