以抗氧化和抗腫瘤活性為指導(dǎo)優(yōu)化提取工藝,分別采用熱水提取,兩步聯(lián)合酶解法(木瓜蛋白酶和胰蛋白酶)從厚殼貽貝中提取和分離純化具有生物活性的貽貝多糖,對(duì)其進(jìn)行基本理化性質(zhì)分析和DEAE-Cellulose 52 柱層析分離純化并進(jìn)行體外抗氧化、抗腫瘤生物活性研究。通過對(duì)熱水提取法,單一酶提法和聯(lián)合酶提取法得到的貽貝多糖粗品進(jìn)行理化性質(zhì)分析和活性篩選,發(fā)現(xiàn)聯(lián)合酶解提取得到的貽貝粗多糖在得率、純度和生物活性上均優(yōu)于其他方法提取得到的粗多糖,其提取粗多糖的得率為23.69%。聯(lián)合酶提粗多糖體外抗氧化研究表明其對(duì)DPPH自由基、超氧陰離子自由基和脂質(zhì)過氧化物清除的半最大效應(yīng)濃度(concentration for 50% of maximal effect,EC50)分別為3.75、5.01 mg/mL和2.41 mg/mL;對(duì)體外前列腺癌DU-145細(xì)胞48 h,IC50為2.93 mg/mL。通過分離純化后對(duì)各組分的得率和組成分析表明:聯(lián)合酶提可提高貽貝多糖類糖胺聚糖(MT3)的含量,并達(dá)到13.5%,單糖組成主要為Man、GlcN、GlcUA、Gal和Fuc,分子質(zhì)量約為18 kD。和其他組分相比,MT3 組分表現(xiàn)出良好的體外抗腫瘤活性,對(duì)體外前列腺癌DU-145細(xì)胞48 h,IC50 為2.71 mg/mL。通過活性追蹤和工藝優(yōu)化結(jié)果表明,熱水提取后酶解工藝不僅可以降解蛋白提高多糖的純度,而且還可以顯著提高貽貝多糖中類糖胺聚糖的含量,而貽貝類糖胺聚糖是貽貝多糖的主要活性組分,具有良好的抗腫瘤活性。
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