領(lǐng)學(xué)術(shù)科研之先，創(chuàng)食品科技之新
—— 中國(guó)食品雜志社
脫氧雪腐鐮刀菌烯醇（deoxynivalenol，DON）的模擬表位（CDON），是從噬菌體展示隨機(jī)肽庫(kù)中淘 選出來(lái)的七肽，可模擬DON與抗DON抗體結(jié)合。為了在酶聯(lián)免疫吸附方法（enzyme linked immunosorbent assay， ELISA）中用重組蛋白替代DON偶聯(lián)物，以期開(kāi)發(fā)出能代替偶聯(lián)DON人工抗原的無(wú)毒檢測(cè)DON的ELISA方法，通 過(guò)構(gòu)建重組表達(dá)載體pGEX-CDON和pC89S4-CDON，并在大腸桿菌表達(dá)系統(tǒng)中分別表達(dá)和純化GST-CDON和pⅧ- CDON融合蛋白，比較測(cè)定2 種融合蛋白與抗DON抗體的結(jié)合效果。ELISA方陣滴定結(jié)果顯示：純化的融合蛋白 具有良好的反應(yīng)原性。在間接競(jìng)爭(zhēng)性ELISA中，當(dāng)以融合蛋白GST-CDON為包被抗原時(shí)，檢測(cè)限為31 ng/mL，線(xiàn) 性范圍為31～500 ng/mL，IC50為194 ng/mL，加標(biāo)回收率為54.1%～65.4%，變異系數(shù)為6.28%～13.37%；當(dāng)以融合 蛋白pⅧ-CDON為包被抗原時(shí)，檢測(cè)限為15 ng/mL，線(xiàn)性范圍為15～500 ng/mL，IC50為94 ng/mL，加標(biāo)回收率為 81.7%～89.0%，變異系數(shù)為3.15%～7.55%。
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