目的:考察雙酶法制備哈蟆油蛋白的最佳工藝。方法:以哈蟆油為原料,采用檸檬酸浸提和水煎煮的方法提取哈蟆油蛋白,先后加入胃蛋白酶和堿性蛋白酶進(jìn)行酶解,根據(jù)酶解后哈蟆油蛋白相對分子質(zhì)量分布,應(yīng)用單因素和正交試驗(yàn)確定哈蟆油蛋白酶解的最佳條件。結(jié)果:最佳酶解條件為胃蛋白酶與底物比(m/m)1∶2 000、酶解時間2 h、堿性蛋白酶與底物比(m/m)1∶100、酶解時間6 h,酶解后哈蟆油蛋白相對分子質(zhì)量小于5 000所占的比例為94.85%,哈蟆油蛋白中蛋白質(zhì)含量為49.85%。結(jié)論:胃蛋白酶與堿性蛋白酶結(jié)合使用可以有效地降低哈蟆油蛋白的相對分子質(zhì)量,利于人體吸收。
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