目的:構(gòu)建釀酒酵母菌株的簡單重復(fù)序列間多態(tài)性指紋圖譜數(shù)據(jù)庫并建立序列特異性擴增區(qū)(sequencecharacterized amplified region,SCAR)標(biāo)記技術(shù),為釀酒酵母菌株的分類、遺傳親緣關(guān)系鑒定及菌種專利保護提供可靠的DNA分子標(biāo)記技術(shù)依據(jù)。方法:在簡單重復(fù)序列間多態(tài)性(inter-simple sequence repeat,ISSR)指紋數(shù)據(jù)分析基礎(chǔ)上進行聚類分析并對菌種進行分類鑒定,同時將釀酒酵母菌株9號和15號中擴增獲得的ISSR特異性DNA帶轉(zhuǎn)化為可以直接用于菌株快速鑒定的SCAR分子標(biāo)記。結(jié)果:構(gòu)建23 株釀酒酵母的ISSR指紋圖譜,并在相似系數(shù)為0.85水平上將23 個供試菌株分為3大類,其中,1、2、4、7、15、16、17、19、20、21、23聚為第一類;10、11、12、13、14、18號菌株聚為第二類且10號和11號菌為同一菌株;3、5、6、8、9、22號菌聚為第三類且屬于同一菌株。此外,利用所獲得的2 個特異性條帶成功轉(zhuǎn)化為序列特異性擴增區(qū)分子標(biāo)記。結(jié)論:在生產(chǎn)上釀酒酵母菌株遺傳背景差異不大,常存在同物異名現(xiàn)象,而采用ISSR指紋及其SCAR分子標(biāo)記技術(shù)快速鑒定釀酒酵母菌株在工業(yè)生產(chǎn)上具有重要意義。
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