以素食者糞便為樣品,大豆異黃酮為底物,對產(chǎn)雌馬酚的腸道菌進行分離培養(yǎng)及鑒定。采用紫外光譜法對雌馬酚定性、定量測定,用肉眼觀察、掃描電鏡、生理生化、16S rDNA全序測序方法對分離得到的LJ-G1腸道菌進行菌株鑒定。結(jié)果表明:麥康凱和BHI培養(yǎng)基、厭氧平板劃線培養(yǎng)法更適于產(chǎn)雌馬酚腸道菌的分離篩選。采取10 g糞樣稀釋到10-5接種,在pH 7.3、溫度37 ℃、厭氧培養(yǎng)36 h的條件下,培養(yǎng)基中雌馬酚產(chǎn)出量達到10 μg/mL以上。經(jīng)鑒定分離得到的LJ-G1菌株為G-桿菌;根據(jù)生理生化反應結(jié)果,查閱《常見細菌系統(tǒng)鑒定手冊》,確定LJ-G1為河生腸桿菌;16S rDNA全序測序顯示與腸桿菌同源性達99%。
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