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IPTG與乳糖聯(lián)合誘導(dǎo)重組大腸桿菌右旋糖酐蔗糖酶表達(dá)
來(lái)源:食品科學(xué)網(wǎng) 閱讀量: 162 發(fā)表時(shí)間: 2017-06-07
作者: 李攀峰,張洪斌,胡雪芹
關(guān)鍵詞: 異丙基-β-D-硫代吡喃半乳糖苷;乳糖;右旋糖酐蔗糖酶;表達(dá);聯(lián)合誘導(dǎo)
摘要:

研究異丙基硫代-β-D-呋喃半乳糖苷(isopropyl-β-D-1-thiogalactopyranoside,IPTG)與乳糖聯(lián)合誘導(dǎo)重組大腸桿菌右旋糖酐蔗糖酶表達(dá)的效果。在利用IPTG和乳糖分別作為誘導(dǎo)劑對(duì)右旋糖酐蔗糖酶工程菌Escherichia coliBL21(DE3)/pET28-dexYG進(jìn)行誘導(dǎo)表達(dá)的基礎(chǔ)上,嘗試將此兩種誘導(dǎo)劑聯(lián)合使用,在降低成本的同時(shí)獲得較好的表達(dá)效果。在獲得最佳培養(yǎng)基的基礎(chǔ)上,考察菌體IPTG與乳糖的聯(lián)合加入量、菌體濃度、誘導(dǎo)時(shí)間對(duì)右旋糖酐蔗糖酶表達(dá)的影響。在菌濃(OD600 nm)達(dá)到3.0時(shí),加入0.1 mmol/L IPTG 95 μL+2.5 g/L乳糖,25 ℃混合誘導(dǎo)培養(yǎng)4 h,酶活力最高,達(dá)到40.44 U/mL。IPTG與乳糖聯(lián)合誘導(dǎo)重組大腸桿菌右旋糖酐蔗糖酶表達(dá)可行。

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