采用分子生物學(xué)與形態(tài)學(xué)觀察相結(jié)合的方法,鑒定分離自鹽生海蘆筍中的內(nèi)生真菌Salicorn 35。提取基因組DNA后分別對(duì)其18S rDNA和ITS1-5.8S-ITS4區(qū)域進(jìn)行PCR擴(kuò)增并進(jìn)行單克隆測(cè)序分析。將序列提交NCBI進(jìn)行核酸序列同源性比較,利用MEGA5.0軟件對(duì)序列進(jìn)行分析,構(gòu)建系統(tǒng)發(fā)育樹。結(jié)合形態(tài)學(xué)與顯微鏡觀察將該菌鑒定為茄病鐮刀菌(Fusarium solani)。在此基礎(chǔ)上,以抗氧化活性為指標(biāo),采用Plackett-Burman試驗(yàn)、最陡爬坡試驗(yàn)和響應(yīng)曲面法對(duì)Salicorn 35菌株的發(fā)酵條件進(jìn)行優(yōu)化,最大限度地提高其抗氧化活性。優(yōu)化后的最佳培養(yǎng)基配方為(質(zhì)量分?jǐn)?shù)):酵母膏1.5%、蛋白胨2.7%、土豆40%、麥芽糖3%、甘露醇1%、葡萄糖1.5%、味精1.0%、氯化鈉6.0%,pH5;采用此培養(yǎng)基所得發(fā)酵產(chǎn)物對(duì)DPPH自由基的清除率為76.75%,比優(yōu)化前(清除率57.77%)有顯著提高。
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