采用響應(yīng)面法對(duì)短乳桿菌產(chǎn)尿苷磷酸化酶發(fā)酵培養(yǎng)基及發(fā)酵條件進(jìn)行優(yōu)化。以葡萄糖酵母膏培養(yǎng)基為基礎(chǔ)培養(yǎng)基,通過單因素和Plackett-Burman設(shè)計(jì)法確定促進(jìn)尿苷磷酸化酶合成的4個(gè)較為重要的有效因子:葡萄糖(P=0.002)、酵母粉(P=0.054)、磷酸根(P=0.059)和尿苷(P=0.001);在此基礎(chǔ)上采用最陡爬坡試驗(yàn)逼近最大響應(yīng)區(qū)域,并利用Box-Behnken設(shè)計(jì)對(duì)影響顯著因素進(jìn)行優(yōu)化,得到最適培養(yǎng)基組成和培養(yǎng)條件為:NaCl 5g/L、葡萄糖18.30g/L、酵母粉15.71g/L、蛋白胨15g/L、磷酸根3.99g/L、肌苷20mmol/L、尿苷21.38mmol/L、初始pH8.0、搖床轉(zhuǎn)速110r/min、發(fā)酵溫度32℃、培養(yǎng)時(shí)間14h、接種量1.0%。在此優(yōu)化條件下,短乳桿菌產(chǎn)尿苷磷酸化酶能力達(dá)到1.325U/mg,較優(yōu)化前(0.883U/mg)提高了50.0%。
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