領(lǐng)學(xué)術(shù)科研之先，創(chuàng)食品科技之新
—— 中國(guó)食品雜志社
通過(guò)RT-RCR的方法從高山被孢霉W15菌株中擴(kuò)增到完整的δ5去飽和酶基因，其全長(zhǎng)為1341bp，編碼446個(gè)氨基酸。對(duì)推導(dǎo)的氨基酸序列進(jìn)行分析表明，其N末端存在細(xì)胞色素b5結(jié)構(gòu)域，在序列中還存在3個(gè)保守的組氨酸富集區(qū)。將該基因連接到表達(dá)載體pPIC3.5K上，轉(zhuǎn)化畢赤酵母細(xì)胞，利用G418篩選高拷貝數(shù)的轉(zhuǎn)化子。以雙高γ-亞麻酸為底物，在甲醇誘導(dǎo)的條件下，δ5去飽和酶可催化底物脫氫生成花生四烯酸，其含量占總脂肪酸含量的2.85%。說(shuō)明克隆的δ5去飽和酶基因能在畢赤酵母中進(jìn)行功能性的表達(dá)。
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