以尼龍網(wǎng)為載體,戊二醛為交聯(lián)劑制備固定化脂肪酶(Candida sp. 99-125),并對固定化條件及固定化酶的酶學性質(zhì)進行研究。結(jié)果表明,最適固定化條件為:戊二醛體積分數(shù)3%、交聯(lián)時間60min、脂肪酶質(zhì)量濃度10mg/mL、固定化時間6h。與游離酶相比,固定化脂肪酶的最適溫度從45℃提高至50℃,最適pH值相同,均為7.0,并在pH5.0~7.0范圍內(nèi)均有非常高的活力。固定化脂肪酶相對于游離酶具有更好的熱穩(wěn)定性和pH值穩(wěn)定性,并具有良好的操作穩(wěn)定性,其重復操作5次后相對酶活力仍保持在80%左右。固定化脂肪酶的Km值(0.57mol/L)和最大反應速率Vmax(0.29×10-3mol/(L·s))顯著高于游離酶,對底物的親和力較游離酶弱。
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