采用交聯(lián)酶聚集體技術(shù)制備了海藻糖合酶交聯(lián)酶聚集體(CLEAs),研究了不同沉淀劑、酶與交聯(lián)劑比例、交聯(lián)強度及硼氫化鈉還原處理對海藻糖合酶CLEAs活性的影響及其結(jié)構(gòu)特征與反應(yīng)性能。結(jié)果表明:采用10mg/mL的酶濃度以30%的PEG為沉淀劑,以終濃度0.5%的戊二醛室溫交聯(lián)2h,再以硼氫化鈉還原處理后,制備得到的海藻糖合酶CLEAs最適催化溫度為70℃,比游離酶提高20℃,最適pH為7.0,與游離酶相比,CLEAs的溫度及pH穩(wěn)定性均得到提高,對Zn2+、Cu2+、Fe2+、Al3+金屬離子的抗性明顯增強。微觀形貌分析表明單個海藻糖合酶CLEA粒徑在0.2-0.5μm,眾多CLEA以“腳手架”結(jié)構(gòu)形成大小不一的集簇。
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